Технологии, основанные на системе CRISPR-Cas, обеспечивают точные рабочие процессы редактирования генов, методы обогащения и in vitro-тесты для обнаружения нуклеиновых кислот с возможностью лёгкого перенаправления на новые мишени.
Комплекс рибонуклеопротеина Cas (RNP) активируется, когда направляющая РНК связывается с целевой последовательностью, а взаимодействующий домен Cas — со специфическим протоспейсер-прилежащим мотивом (PAM) в молекуле нуклеиновой кислоты.
Форматы доставки могут включать плазмидные конструкции, вирусные векторы, молекулы мРНК, sgRNA и белки Cas.
Инструменты для оптимизации рабочих процессов CRISPR-Cas
Компания New England Biolabs (NEB) предлагает тщательно охарактеризованные нуклеазы Cas и уникальные решения для упрощённого синтеза РНК, клонирования и валидации редактирования генома на основе CRISPR.
Каждая эндонуклеаза Cas протестирована для использования в стандартных приложениях CRISPR.
Например, EnGen® Spy Cas9 HF1 (NEB #M0667) рекомендуется для снижения внецелевой активности in vivo;
EnGen SpRY Cas9 (NEB #M0669) — для расширения редактируемых областей in vivo и устранения требований к PAM in vitro;
а EnGen Lba Cas12a (Cpf1) (NEB #M0653) открывает возможности редактирования дополнительных геномных регионов и используется для эктотермных организмов.
NEBuilder® HiFi DNA Assembly
обеспечивает исключительную эффективность клонирования и упрощает создание экспрессионных векторов Cas-sgRNA, шаблонов одиночных sgRNA или библиотек sgRNA.
Наш широкий ассортимент решений для синтеза и модификации РНК
поддерживает синтез sgRNA и мРНК Cas.
Анализ результатов редактирования генома может быть дополнен валидацией с использованием наших решений для ферментативных тестов,
обнаружения на основе секвенирования по Сэнгеру и секвенирования нового поколения с помощью наборов
NEBNext® Ultra для подготовки библиотек.
