Принцип работы флуоресцентной микроскопии
Образец освещается светом определенной длины волны, который поглощается флуорофорами. В ответ они излучают свет с большей длиной волны (другого цвета). Чтобы отделить слабое флуоресцентное излучение от яркого света возбуждения, в микроскопе используется система оптических фильтров: возбуждающий фильтр, дихроичное зеркало и эмиссионный фильтр. Компоненты подбираются под спектры конкретного флуорофора, поэтому визуализация выполняется по одному «цвету» за раз, а многоцветное изображение получают путем объединения нескольких каналов.
Эпифлуоресценция (Epi-Fluorescence)
В эпифлуоресцентной схеме возбуждение и регистрация флуоресценции проходят по одному оптическому пути через объектив. Такая конструкция обеспечивает высокий сигнал/шум и подходит для широкого круга задач в биологии и материаловедении. Для максимального разрешения рекомендуется использовать объективы с высокой числовой апертурой (NA).


















